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看完這些你就知道多肽標(biāo)記及修飾作用了

更新時(shí)間:2021-03-09點(diǎn)擊次數(shù):1134
  你知道多肽標(biāo)記及修飾作用么?不知道也沒(méi)關(guān)系,今天就讓我們一起來(lái)了解一下吧。
 
  目前多肽標(biāo)記及修飾的內(nèi)容非常多,廣泛應(yīng)用在多肽藥物,多肽生物學(xué),多肽抗體以及多肽試劑的研究中。目前應(yīng)用廣泛的有:非放射性核素標(biāo)記(C13,H2),熒光標(biāo)記(FAM,F(xiàn)ITC),生物素標(biāo)記,磷酸化修飾等。
 
  1、非放射性核素標(biāo)記
 
  目前在非放射性核素標(biāo)記中,使用廣泛的仍然是C13,H2,因?yàn)槠涫褂冒踩派湫孕 ,F(xiàn)在有比較*的非放射性標(biāo)記的氨基酸,可以按照正常的多肽合成方法將標(biāo)記好的氨基酸直接連接到多肽上。
 
  2、熒光標(biāo)記
 
  熒光標(biāo)記由于沒(méi)有放射性,實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單。因此,目前在生物學(xué)研究中熒光標(biāo)記應(yīng)用非常廣泛,熒光標(biāo)記方法與熒光試劑的結(jié)構(gòu)有關(guān)系,對(duì)于有游離羧基的采用的方法與接肽反應(yīng)相同,也采用HBTU/HOBt/DIEA方法連接。但是對(duì)于FITC標(biāo)記,需要在連接FITC前,增加一個(gè)氨基己酸,避免在切割的過(guò)程中被TFA切割掉。
 
  3、生物素標(biāo)記
 
  生物素-親合素系統(tǒng) (biotin-avidin system,BAS),是70年代后期應(yīng)用于免疫學(xué),并得到迅速發(fā)展的一種新型生物反應(yīng)放大系統(tǒng)。
 
  由于它具有生物素與親合素之間高度親和力及多級(jí)放大效應(yīng),并與熒光素、酶、同位素等免疫標(biāo)記技術(shù)有機(jī)地結(jié)合,使各種示蹤免疫分析的特異性和靈敏度進(jìn)一步提高。
 
  主要有用于標(biāo)記多肽氨基的生物素N-羥基丁二酰亞胺酯(BNHS)和生物素對(duì)硝基酚酯(pBNP),其中以BNHS常用,當(dāng)然,也可以直接使用生物素也可以標(biāo)記,因?yàn)槠浣Y(jié)構(gòu)上有個(gè)游離的羧基,采用HBTU/HOBt/DIEA方法縮合,由于生物素的溶解度低,使用DMSO/DMF的混合溶劑增加溶解度。
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